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“支原体”你真的了解吗?
来源:本站 {{likeCount}} {{commentCount}} 评论 11/27/2023 12:00:00 AM

近期,全国多地出现儿童肺炎支原体感染病例增多的现象,肺炎支原体以5至9岁的学龄儿童最易感,但是患儿并不局限于这一年龄段。此外,近期成年人的感染率也有所增多。那么,究竟什么是支原体呢?它和细菌或者病毒有什么区别?应用什么检测技术进行诊断?在用药上应该选择哪一类药?

支原体(Mycoplasma)是一群没有细胞壁、介于细菌与病毒之间、能在人工培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物,形态上呈高度多形性,最小个体直径200μm左右,可通过滤菌器。

支原体迄今已分离到150余种,支原体在自然界中分布十分广泛,多为腐生不致病,少数可引起人或动物的感染,主要存在于人体和动物的腔道黏膜上。寄居人体的支原体有16种,对人致病的主要是肺炎支原体、人型支原体、生殖支原体、穿透支原体和解脲脲原体。

接下来我们重点了解一下引起人群感染的肺炎支原体

肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae ,MP)是常见的引起人类呼吸道感染的病原体之一,引起的支原体肺炎约占非细菌性肺炎的1/3。

(一)生物学特性

肺炎支原体无细胞壁,仅有细胞膜,呈高度多形性,常见形态为球形、杆形及长丝形,有时可见分枝与星状体。革兰染色阴性,但不易着色,常用姬姆萨染色,呈淡紫色。大多数肺炎支原体兼性厌氧,有些菌株在初分离时加入5%CO2生长更好,对低渗透压敏感,营养要求高于一般细菌,需加入20%马血清或小牛血清,多数支原体还需添加新鲜酵母浸液、组织液等。支原体繁殖较慢,在固体培养基上35℃培养2-3天,菌落中央的核心部分较厚、向下长入培养基,周边由透明颗粒组成的薄薄的一层贴在琼脂表面,呈油煎蛋菌落。

因支原体无细胞壁,对青霉素、头孢菌素等作用于细胞壁的抗生素不敏感,对脂溶剂、去垢剂和石炭酸、甲醛等常用消毒剂敏感。4℃放置不超过3天,56℃很快灭活。对热、干燥非常敏感、冻干能长期保存。

(二)致病物质与所致疾病

肺炎支原体是支原体肺炎的病原体,主要侵犯呼吸系统。肺炎支原体黏附于黏膜上皮细胞的受体上,吸取宿主细胞的养料生长繁殖,同时释放有毒代谢产物如过氧化氢、核酸酶等使细胞受损。主要通过呼吸道传播,青少年易感,冬秋季较多见,引起间质性肺炎和急性支气管炎,占肺炎发病率的15%-20%,病理变化以间质性肺炎为主。

支原体肺炎全年均可发病,但以秋冬季多见。在大、中、小学校和某些集体单位可引起小流行。支原体肺炎病人和支原体携带者是本病的传染源,主要通过飞沫传播。

支原体肺炎起病缓慢,发病初期有咽痛、头痛、发热、乏力、肌肉酸痛、食欲减退、恶心、呕吐等症状。发热一般为中等热度,2-3天后出现明显的呼吸道症状,突出表现为阵发性刺激性咳嗽,以夜间为重,咳少量黏痰或黏液脓性痰,有时痰中带血,也可有呼吸困难、胸痛。发热可持续2-3周,体温正常后仍可遗有咳嗽。

(三)实验室检测

肺炎支原体感染的实验室检查方法主要有:微生物分离培养、血清免疫学检查、分子生物学检查。

1.微生物分离培养

①标本采集

可取患者痰、咽拭子、鼻咽洗液、支气管分泌物等。因肺炎支原体有黏附细胞的作用,以拭子标本为好。支原体对热和干燥敏感,取材后应立即接种或置转运培养基中(蔗糖磷酸盐缓冲液),4℃能保存72h,-70℃或液氮能长期保存。

②直接显微镜检查

革兰染色不易着色,电子显微镜观察无细胞壁,易与细菌鉴别。

③分离培养

常用的培养基是以牛心消化液为基础,另加20%小牛血清及新鲜酵母浸液制成的液体或固体培养基。在含5%CO2气体环境下培养,初分离时,一般10天左右长出菌落,呈致密圆形,常不出现油煎蛋状,需经数次传代后,菌落开始典型。肺炎支原体的分离阳性率不高,对临床快速诊断意义不大,但对流行病学调查有重要意义。

④鉴定

主要靠形态染色、菌落特征、生化反应及特异性生长试验等。

但是微生物学检测所需时间长,过程复杂,现在多以免疫学检测替代微生物学检测。

2.血清免疫学检测

血清学为应用免疫学的方法测定患者血清中特异性抗体的方法,常用的有酶联免疫吸附试验(ELISA)间接血凝实验(PHA)等。阳性结果可以辅助诊断,急性期和恢复期双份血清对照试验可以进行回顾性诊断。

肺炎支原体的非特异血清学方法有肺炎支原体冷凝集试验与MG链球菌凝集试验,对支原体肺炎能起辅助诊断的作用。冷凝集试验是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性试验,其方法是将患者的稀释血清与O型Rh阴性红细胞在4℃下做凝集试验。约50%肺炎支原体感染者为阳性(效价≥1:64),效价越高或双份血清呈4倍以上升高,肺炎支原体近期感染的可能性越大。MG链球菌凝集试验是一种非特异性凝集试验。肺炎支原体感染后,约1/3的患者血清中可出现能凝集甲型链球菌MG株的抗体,效价≥1:20,而病毒性肺炎患者常无此抗体出现,故本试验有助于两者的鉴别。

有研究报道,肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中支原体抗原具有很高的特异度和灵敏度。

人体感染肺炎支原体后,能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早,一般在感染后1周出现,3-4周达高峰,以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2-3周,当患者出现症状而就诊时,IgM抗体已达到相当高的水平,因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如果IgM抗体阴性,可能为处于窗口期或感染时间较长导致IgM抗体逐步消失,不能否定肺炎支原体感染,此时需检测IgG抗体并结合临床表现进行综合判断。IgG较IgM出现晚,需动态观察,如显著升高提示近期感染,显著降低说明处于感染后期。

3.分子生物学检查

PCR是目前常用的诊断病原体感染的方法,特异性和敏感性均较高。

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由于方法学的差异,因此采用不同的检测方法各有利弊。那么哪一种方法更合适呢?

肺炎支原体培养营养需求较高,培养成功的概率较低,如果培养结果为阴性,则意味着用了较长时间来证实是否存在肺炎支原体感染,因此减低了其临床应用价值;

PCR进行DNA测试快速敏感,但因价格昂贵而且很难鉴别患者体内肺炎支原体DNA是否在复制,或者是已经处于缓解期病原体已经不再存活,因此未被广泛采用,一般用作鉴别一些特殊感染如衣原体、百日咳杆菌、军团菌等;

血清学检测虽特异性和敏感性目前都尚未达到理想水平,但因其方便快捷,耗时较短,是目前在临床上应用最为广泛的方法。

(四)常用药物

一线治疗药物是大环内酯类抗菌药物,包括阿奇霉素、红霉素、克拉霉素等。

对于大环内酯类药物治疗无效、8岁以上儿童可以使用四环素类药物,如多西环素、米诺环素。

文:卢敬敬 / 审核:孙世玲

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